CRISPR/Cas9技术的最新发展使得利用CRISPR/Cas9技术可以很容易地定位感兴趣的基因非洲爪蟾蜍。这门课程的设计就考虑到了这一点。我们的目标是让每个学生设计一套针对他们基因或生物学兴趣的实验。在开始课程之前，学生将被期望选择感兴趣的基因，教师将生成针对这些基因的sgrna。这些基因可以是学生自己的基因，也可以是从教师提供的基因库中选择的。基因靶向实验将与其他操作相结合，如组织外植体和移植以及实时成像来分析基因的功能。

爪蟾越来越多地被用作成像试验台，以研究细胞骨架和细胞内运输在细胞生物学和形态发生背景下的作用。本课程保留了库存mrna，用于将荧光蛋白靶向到特定结构，以研究细胞形状和细胞骨架动力学，但鼓励学生携带或建议额外的工具，包括荧光生物传感器，张力传感器等。当活细胞荧光成像与显微手术、移植和游离细胞培养相结合时，爪蟾的力量可以被利用。

在本课程中，学生将分析基于CRISPR/Cas9的基因损耗产生的任何表型，同时学习各种可用的技术非洲爪蟾蜍．在以前的课程中，我们指导学生在各种各样的基因的消融，并帮助他们设计适合他们的生物学兴趣的分析。最近，学生们瞄准了自闭症基因、甲状腺基因和免疫调节剂，其中一些已经发表了文章。涉及的方法将包括微注射和分子操作，如CRISPR/Cas9敲除，反义morpholino枯竭，转基因和mRNA过表达。此外，学生可以将这些技术与外植体和移植方法结合起来，以简化或测试组织水平的相互作用。其他方法包括mRNA原位杂交和蛋白质免疫组化以及用于基因比较和功能分析的基本生物信息学技术。生物化学方法，如蛋白质组学和质谱和生物力学概念也将被讨论。最后，为了可视化亚细胞和细胞间活动，我们将介绍各种样品制备和成像方法，包括延时、荧光成像、光学相干层析成像和共聚焦显微镜。这些都是由来自尼康，徕卡，索拉布和布鲁克的最先进的设备促成的。

由于这门课程的量身定制的性质，它是适合那些新的非洲爪蟾蜍领域，以及对新兴技术感兴趣的更高级的学生。点击这里了解更多．