牛津仪器集团的一部分狗万正网地址
扩大

疾病生物制造商开发的超敏感荧光谱研究

荧光光谱技术是一种广泛而有力的研究大分子及其相互作用的技术。特别是使用荧光共振能量转移(FRET)模式与编码纳米晶体荧光微珠相结合的技术,目前正作为开发早期医疗诊断设备/系统的潜在手段进行探索。万博电脑网页版登录

下面的图1显示了利用荧光光谱和微珠分析的示例应用程序的示意图。该实验旨在证明纳米晶体与FRET光谱结合后,可以作为自身抗体存在的检测器。自身抗体可以作为健康个体疾病发展的标志。

敏感的烦恼光谱学

图1:FRET流程示意图

这个例子[来自参考文献1]着眼于人类抗体拓扑异构酶或Topo I(如图1中的绿色分子所示)。测试是为了检测抗Topo I抗体(图中蓝色分子)的存在。

制备样品使得Topo I抗体分子(绿色)与纳米晶体附近的微珠连接。当这些孵育抗Topo I抗体(蓝色)时,后者将自己连接到顶部I分子。通过与标记的含有染料的溶液(Alexafluor633)二次抗体(棕色)的进一步温育,发生进一步的结合,如图所示,其促进供体激发纳米晶体和受体染料分子之间的褶皱路径。

当用宽带灯(450nm-500nm)照射时,由于靠近粘合,通过FRET介导染料分子(红色)的发射;如果不存在抗TOPO I抗体,则不会发生结合,并且不会从附着于第二抗体的染料分子中没有发射,这将在溶液中自由移动。可以通过用激光直接激发来确认后者的存在532nm的来源。

关于这种原则上的深入细节,由Alyona Sukhanova et.al所证明。可以在参考文献1中找到。

敏感的烦恼光谱学

图2:fret光谱学典型装置的配置

典型的设置如下图2所示,显示摄谱仪的主要部件,高灵敏度探测器,显微镜可调x - y样品阶段,选择的激励源和耦合光的手段从显微镜的输出到摄谱仪(在这种情况下通过纤维)。其他配置包含一个扫描共焦显微镜设置和耦合的光信号,共焦光圈后,送货到纤维摄谱仪,同时其他配置使用直接耦合的光通过继电器出口的光学显微镜的入口狭缝摄谱仪。

参考资料

Alyona Sukhanova, Andrei S. Susha, Alpan Bek, Sergiy Mayilo, Andrey L. Rogach, Jochen Feldmann, Vladimir Oleinikov, Brigitte Reveil, Beatrice Donvito, Jacques H.M. Cohen, Igor Nabiev,“蛋白质组学的纳米晶体编码荧光微珠:抗体分析和Aitoimmune Diseases的诊断”,Nano Lett。, 7(8), 2322 -2327, 2007。10.1021 / nl070966 + s1530 - 6984 (07) 00966 - 6

Medintz IL, Clapp AR, Mattoussi H, Goldman ER, Fisher B, Mauro JM,“基于量子点FRET捐赠者的自组装纳米尺度生物传感器”,《自然材料》2(9):630-638 2003年9月

Marcel Bruchez Jr.,Mario Moronne,Peter Gin,Shimon Weiss,A.Paul Alvisatos,'作为荧光生物标签的半导体纳米馆',Science 281,2013(1998)

日期:N / A.

作者:和或

类别:应用注释

下载为PDF.

分享

相关资产