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EMCCD摄像机在信号水平上提供清晰的分辨率图像

挑战的背景

钙成像是一种广泛应用的技术,可用于研究细胞类型的信号,如神经元和心肌细胞。荧光指示剂如fura-2, fluo-4和基因编码钙指示剂可用于直接观察游离Ca2+水平的变化。通过使用各种荧光显微镜技术,可以检测到对各种调节剂的Ca2+水平波动,并随后分析这些响应的情况。因此,这种方法可以用来帮助我们进一步了解影响心脏细胞功能和生理的无数相互作用,并用于筛选心血管疾病的新治疗方法。

活细胞信号传递过程的成像在技术上是困难的:细胞信号传递事件本质上是动态的,有时只需要在背景水平上区分非常小的信号强度变化。可能还需要显示这些事件的本地化。此外,荧光标记本身可以影响正常的细胞生理,因此需要保持在低负荷浓度,这就需要超灵敏的探测器至关重要。

技术解决方案

EMCCD技术为检测最弱信号提供了最高的灵敏度。EMCCD相机可以在信号水平上提供清晰的分辨率图像,甚至低于最新一代基于sCMOS的相机的检测极限。EMCCD相机还能够高速成像,裁剪模式进一步提高了时间分辨率。

心脏Ca的Andor相机解决方案2 +信号的研究

Andor推荐iXon Life EMCCD用于心脏细胞钙成像,通常使用低光光学切片方式。无与伦比的EMCCD灵敏度和精湛的自定义ROI速度使iXon Life 888和897 EMCCD模拟可能的最佳探测器,用于暂时解决快速钙火花和信号级联,以及一些研究所需的低电平信号的微小变化。iXon Life提供的卓越灵敏度也意味着染料浓度可以降至最低,减少了“染料缓冲效应”,这可能会扭曲所研究的生理学。

关键需求 心血管细胞信号通路的成像方法:iXon Life
检测和量化Ca2 +低信号强度下的动力学。 单光子灵敏度和可忽略的读噪声底与> 90% QE相结合,以捕获和记录大多数入射光子。最小的热噪声和时钟诱导的电荷(杂散噪声)导致极好的分离背景噪声。结果-增强光子检测和加速实验吞吐量。
用极好的时间分辨率测量动态事件 iXon Life 888是目前最快的EMCCD检测器,在512 x 512阵列上读取速度为93 fps,在全1024 x 1024阵列上读取速度为26 fps。进一步加速可以使用用户定义的子数组,从128 x128子数组超过600 fps。结果-实现极好的动态事件时空分辨率。
准确的细胞生理学 由于95% QE和可忽略的读噪声,iXon Life具有特殊的灵敏度。这让你减少曝光时间和荧光团浓度更准确的细胞生理。结果-获得准确的生理数据。
质量和寿命 iXon Life配有Andor独家的UltraVac™真空传感器外壳。久经验证的永久真空工艺不仅对冷却至关重要,而且对保护背光传感器免受水分和冷凝物的侵害至关重要。结果——年复一年地保持高绩效。

参考文献

体内心脏细胞信号成像:高信号Ca2+指标GCaMP2的心脏表达。Yvonne N. Tallini, Masamichi Ohkura, ben - rak Choi, Guangju Ji, Keiji Imoto, Robert Doran, Jane Lee, Patricia Plan, Jason Wilson,洪博Xin, Atsushi Sanbe, James Gulick, John Mathai, Jeffrey Robbins, Guy Salama, Junichi Nakai, Michael I. Kotlikoff。国家科学院学报2006年3月,103 (12)4753-4758;DOI: 10.1073 / pnas.0509378103

日期:2018年12月

作者:艾伦•马伦

类别:解决方案请注意

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