挑战的背景
钙成像通常用于神经生物学监测细胞的活动,如神经元或神经胶质细胞。荧光指标,如fura-2, fluo-4或遗传编码钙指标(GECI),可用于直接可视化的变化,自由Ca2+水平响应各种生理条件或刺激。当与共聚焦、双光子显微镜、SCAPE或光场显微镜等方法相结合时,就有可能从单个突触或树突观察神经元活动的定位和动态,直到作为更广泛神经网络一部分的多个细胞的同步作用。对这些过程的理解可以应用于神经生物学的许多领域,如新型治疗方法的开发,包括对帕金森病或阿尔茨海默病等神经退行性疾病的治疗。
细胞信号事件通常是高度动态的,无论是就它们发生的速度而言,还是就涉及的信号强度而言。这使得成像探测器的选择非常重要,因为我们不仅必须实现高时间分辨率,而且还需要具有良好的空间分辨率,并能够处理测量过程中信号强度水平的变化。
你需要最宽的视场还是最宽的动态范围?看看新的Sona背光sCMOS相机32毫米的视野和95%的量化宽松。
技术解决方案
sCMOS相机具有提供高帧率和视野的潜力,使它们非常适合需要出色的时间分辨率的钙成像实验。以往的相机技术,如CCD和EMCCD,在速度和空间分辨率方面都受到限制。最新的sCMOS相机提供了卓越的灵敏度和处理动态图像的能力在100帧每秒(fps)的顺序,这项工作所需要的。
用于高速钙成像研究的Andor相机解决方案
安铎强烈推荐Zyla 4.2 PLUS带有10点摄像头连接对于速度是最关键参数的实验。带相机链接的Zyla 4.2 PLUS提供了最快的速度,在全分辨率(2048 x2048)下达到101 fps。通过使用用户可定义的ROI和高达1 627 fps的“高速”模式,速度可以进一步提高,ROI为128 x 128。Zyla还提供了宽视场和高灵敏度的420万像素传感器,QE为82%。
关键需求 | 高速钙成像解决方案:Zyla 4.2 Plus与相机链接 |
实现极好的细胞信号事件的时间分辨率。 | 当您的实验需要最快的帧率时,Zyla 4.2 PLUS带Camera Link是相机的选择-以及良好的视野和灵敏度。在全分辨率的Zyla 4.2 PLUS与相机链接运行在101帧/秒。通过使用roi,速度可以进一步提高:在512x512下406帧/秒,在128x128下1627帧/秒。这比最快的EMCCD相机快3-5倍。结果:增强了细胞信号事件的时间分辨率。 |
图像结构,如突触、轴突和树突 | Zyla拥有4.2百万像素的格式传感器,6.5微米像素和高灵敏度,可以在60倍和40倍放大倍率下提供出色的空间分辨率。结果-在细胞内实现卓越的空间分辨率和定位。 |
观察并量化信号水平的大变化。 | 高动态范围33 000:1,优于99.8%线性意味着您可以准确量化和比较高动态图像。结果——对你的实验数据有信心。 |
使用GECI和其他标记物记录体内研究的准确生理学。 | Zyla由于82% QE和极低的读取噪声(仅0.9e-)而具有卓越的灵敏度。这使您可以减少曝光时间和荧光基团浓度,减少光漂白和光毒性,保持潜在细胞信号传导过程的准确生理。结果-为体内研究提供准确的生理数据。 |