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3D、4D、5D和6D显微镜检查。

45D显微镜
这张图像来自用量子点标记的活体神经元的4D时间序列。由UMD的Tom Blanpied博士提供。

在现代生物学研究的许多领域,对活细胞或模型生物体进行快速、多维成像的能力变得越来越必要。许多基本的生物学现象(跨越发育、修复、癌症、细胞周期、信号、运动、细胞内运输和病毒途径)都涉及在三维空间中快速移动的微观结构。为了“实时”有效地捕捉这些复杂的交互过程,我们需要通过所有三个空间维度对细胞进行快速延时成像,即有效的4D成像。

此外,由于我们通常希望跟踪多个细胞内结构的运动和相互作用,这通常需要我们同时或非常快速地在多个光谱分离荧光团标签(即5D)的激发和成像之间切换!在所有活细胞或生物体的直接成像研究的基础上,人们希望通过最小化光毒性细胞/组织损伤和合并荧光团的光漂白,尽可能长时间地保存活体。可用于5D细胞成像的技术包括旋转圆盘共焦显微镜、反褶积宽场和结构化照明,所有这些都可以受益于使用电子倍增CCD技术。e、 g.iXon EMCCD摄像机。

45D显微镜
与4/5D显微镜相关的量子效率和荧光染料

Andor的EMCCD技术是将其整合到超灵敏4/D显微镜装置中的理想探测器,无论是作为我们革命共焦活体细胞成像系统的关键组件,还是作为“独立”EMCCD+iQ成像软件解决方案。所提供的非凡信噪比(S/N)远远大于传统点扫描探测器所提供的信噪比。此外,由于它是一种快速读出成像设备,EMCCD可产生快速帧速率,非常适合快速采集z堆栈和延时序列。通过在多个荧光团之间快速切换,甚至将发射信号同时拆分到传感器的不同区域,可以访问光谱维度。也有可能进行本目录其他部分所述的真正的“光谱成像”。本节其他部分将对此进行介绍。通过最小化激发功率,染料光漂白率和细胞光毒性显著降低。iXon3 EMCCD相机和Luca电子倍增CCD成像平台均以多MHz的快速读出速度显示单光子灵敏度和高量子效率(QE)。

日期:不适用

作者:安道尔

类别:申请须知

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