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研究人员获得了洞察酶PICH的DNA解缠结通过分子级结构的AFM图像的作用。他们发现PICH促进积极DNA超螺旋,后来在其解开通过另一种酶的帮助。
长,性质螺旋DNA分子这意味着姐妹染色单体——一对即将独立的染色体——错综复杂地纠缠在一起。这种缠绕可以形成成千上万的超细桥,这些桥必须在细胞分裂开始前被分解。虽然已知PICH (plk1相互作用检查点解旋酶)覆盖超细桥,但其在解缠中的作用尚不清楚。
虽然调查这个问题,一队在丹麦研究人员和法国大学的鉴定酶促反应中,PICH引起积极的DNA超螺旋,或过卷。此外,正超螺旋在由其它酶随后的DNA解缠结实际上辅助(II型拓扑异构酶)。
分子级结构的AFM图像显示,在多亚基TRR的存在复杂的含IA型拓扑异构酶IIIα(TOP3A),RMI1,和Rmi24,PICH促进极高水平正超螺旋的。该活动此前被认为是独特的另一个类酶称为反向促旋酶的。该小组还建议模型解释,均与观察到的DNA构象一致的超螺旋机制。
这些结果促进了我们对DNA马达蛋白如何利用超螺旋性来驱动细胞过程的理解。因此,他们可以提供深入了解肿瘤形成的分子水平的原因,病理胚胎发育,和其他机制。
放松和超螺旋标记和后的反应产物的形貌图像上的环境条件下获取暗号用AFM轻敲模式.以2hz的线扫描速率或每张图像不到5分钟的速度获取512 × 512像素的图像。结合Cypher出色的空间分辨率,这些参数意味着图像可以相对迅速地获得,但仍能显示出分子结构的细节。
引文:A. Bizard,J.-F.德语,T. Hassenkam等人,PICH和TOP3A协作以诱导阳性DNA超螺旋。Nat。结构。摩尔。杂志。26.267(2019)。https://doi.org/10.1038/s41594-019-0201-6
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